文章来源:本站 发布时间:2022-04-18
移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于专业人士而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,就要注意正确移液枪使用,避免因小失大。
(1) 装吸头
移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。
(2) 量程设定
操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10~100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35~100%量程范围内操作。
量程调节:当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。
(3) 润洗
粘稠液体可以通过吸头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出,吸头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。
用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。
(4) 吸头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。
(5) 吸头浸入深度
0.1-10μL:1-2mm
10-200μL:2-3mm
200-2000μL:3-6;Over 2000μL:6-10mm
(6) 吸头浸入时间
吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
(7) 吸液速度
匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
(8) 排液及吹液
先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。排液四种方式:沿内壁、在液面以上、在液体表面、液面下。
(9) 手温
移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
(1) 影响移液枪精度因素
① 温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差;
② 气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差;
③ 吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头;
④ 试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差;解决办法:反复抽吸4~5次就可改善。
(2) 使用注意事项
① 吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
② 为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为,吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
③ 浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
④ 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。
⑤ 移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
⑥ 移液器未装吸头时,切莫移液。
⑦ 在设置量程时,请注意,旋转到所需量程,数字清楚显示在窗中,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则,会卡住机械装置,损坏移液器。
⑧ 移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
⑨ 严禁使用移液器吹打混匀液体。
⑩ 不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
移液器在使用过程中,如果怀疑其精确度,可根据以下提示自行检测:
(1) 移液器是否有漏气?
① 自行检测:目视法检测:将吸取液体后的移液器垂直静置15秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出,说明有漏气现象。压力泵检测:使用专用的压力泵,检测压力情况,判断是否漏气。
② 可能的原因:
² 吸头是否匹配?—— 使用原装匹配的吸头
² 装配吸头时有无上紧?
² 移液器内部气密性不好?
(2) 环境的温度差异是否会影响准确度?
移取液体的温度与吸头和移液器的温度不一致的情况下,液体温度高于吸头的,移取的液体体积会偏大,液体温度低于吸头的,移取的液体体积会偏小。
(3) 样品的密度和水是否有明显的区别?
大部分移液器出厂前的校准是用水作为标准液进行测试的,如果所操作的液体与水的比重有很大差异,所给出的不精确度和不准确度就不能满足,从而产生误差。
(4) 吸液速度太快是否会导致体积不准确?
吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。ps:移液器长时间不用时建议将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延长移液器的使用寿命。